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Le cours avance… les notes doivent sortir… et en attendant le deuxième examen téorique (et dernier du cours), les prof ont dejà corrigé les comptes-rendus et les examens TP.

Et grande sourprise! J’AI 9,5 SUR 10! UOUOUOUOUO

Il va falloir que je m’y mette à fond ce deuxième examen pour continuer à avoir ces supper notes! Je suis un monstre de la chimie!

Dans un de mes derniers post j’ai expliqué un peu n’importe comment ce que je fais pour commencer un clonage de proteines. Depuis ce jour, j’ai reçu plusieures questions qui m’ont permis de voir que le niveau était un peu trop haut pour la plus part des gens qui m’ont lu. Donc, j’ai décidé de repondre à une question assez repetée: Quest-ce que c’est une PCR?

La técnique de la PCR (de l’anglais Polymerase Chain Reaction) a été décrite l’année 1986, par Kary Banks Millis (Prix Nobel en Chimie le 1993). Cette téchnique permet d’obtenir une grande quantité de copies d’un fragment d’ADN grâce à l’enzyme DNA polymerase, qui peut copier (repliquer) une chaîne simple d’ADN en partant d’une region en double chaîne.

Qu’est-ce qu’on a besoin pour celà?

  • ADN “moule”: C’est la sequence d’ADN qu’on veut amplifier. Il est en double chaîne. Dans mon cas, il s’agit de la partie d’expression du gène de la metallothioneine que je veux étudier, qui se trouve dans un vecteur.
  • Primers ou amorces: Sont des oligonucleotides (petits fragments d’ADN) qui ont été dessinés de façon qu’ils vont nous servir pour déterminer la partie à amplifier parmi la totalité du ADN “moule”. Ils sont complementaire à la chaîne originale d’ADN, et, en plus, on y ajoute une cible pour un enzyme de restriction. Cette cible nous permetra plus tard de cloner le produit de cette PCR dans un plasmide.
  • Taq polymerase: enzyme termostable qui copie la partie desirée. Il y en a plein types différents, vendus comercielement.
  • dNTP: desoxynucleotides tri-phosphate. C’est le substract necessaire pour polymeriser l’ADN nouveau: dATP, dCTP, dGTP et dTTP. Sont les 4 bases ou composants de l’ADN et que la Taq placerà un derrier l’autre en suivant la sequence moule.
  • MgCl2: des ions de Magnesium, un cofacteur necessaire pour l’enzyme. Il faut bien calculer la bonne concentration parce que s’il y en a trop, l’efectivité diminue. On va travailler à la concentration minimale parce que celà augmente l’especificité de la réaction.
  • Buffer ou tampon: solution qui maintien le pH stable pour la bonne marche de la polymerase.
  • Eau ultra pure (miliQ).

La PCR est une repetition d’un cycle qui a trois pas: dénaturalization, hybridation et elongation. Pendant la dénaturalization, l’ADN moule, qui est une double chaîne, va s’ouvrir du à l’haute temperature (95ºC). Ceci est un pas très important, parce que si la dénaturalization n’est pas complète, la quantité de produit finale est beaucoup plus basse.

Tout suite, on fait descendre la temperature, qui permet la rénaturalization du DNA, et c’est en ce moment là que les amorces vont hybrider à ces endroits complèmentaires. La température d’hybridation varie en fonction des caracteristiques des amorces utilisés. Une température haute permetrà une hybridation plus spécifique, parcontre, une température trop basse nous donnera des produits inspécifiques.

Au dernier pas, la température monte jusqu’àux niveaux optimes de travail de l’enzyme (entre 70 et 75ºC), de façon que la polymerase peut commencer à copier à partir de l’amorce et repliquer l’ADN. Ce troisième pas peut être plus ou moins long selon la longitude du fragment à amplifier. On considère que pour 1000 bp on a besoin d’environ un minute de temps.

Ces trois pas sont répétés 25-35 fois, de façon a obtenir une grande quantité d’ADN. L’amplification est exponentielle: d’une copie, à la fin du premier cycle, on en a 2, après, 4, 8, 16, 32…

Une fois les cycles terminés, on laisse un dernier pas d’elongation qui va durer plusieurs minutes et qui permetra à la polymerase de finir complètement.

Bon, j’espère que j’ai éclairci un peu ce que c’est cette téchnique. Si vous voulez voir une animation très pédagogique, je vous envoie au site de l’Université Pierre et Marie Curie de Paris: http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/PCR/index.htm

Bientôt, je continuerai la suite des métodes pour cloner et explimer une proteine.

Dès que j’ai commencé ma premiere thèse en France, j’ai découvert Linux. Et plus concretement la distribution Debian. Mon premier contact hors windows a été il fait peut être un peu plus de 3 ans.. et maintenant mon ordinateur est 100% linux.

Si bien mon ordinateur (que j’ai nommé Nil un jour d’inspiration douteuse), lui il a comme OS linux, je me’n sort plus mal que bien. J’aime bien bidouiller mais j’y connais rien. En plus je n’ai jamais le temps de m’y mettre à fond pour réparer ces petites enmerdes que, c’est possible (on m’a dit), avec une autre distibution genre Ubuntu je trouverai pas. Au même temps, j’y peux rien. J’aime Debian et les bidouilles. Mais celà m’enerve des fois de voir me faire offir une webcam ou une imprimante, avec le joli CD pour windows et quelques mois plus tard j’ai pas encore réussi à installer.

Mr.Google aide enormement pour ces types de cas. Aide aussi la morale voir que je ne suis pas l’unique personne du monde que n’arrive pas à faire marcher les trucs!

Mais là où j’ai appris plein choses, et j’ai trouvé la meilleur aide du monde (lache-cul que je suis) c’est dans le forum debian-fr. J’ai ajouté une catégorie de liens vers linux à la colonne de droite. Oui, là, à coté, vous voyez?

Je suis arrivé sur ce forum par hasard, en chercheant de l’info je ne sais plus sur quoi. Les informaticiens du labo (ceux qui m’ont installé la prèmiere fois linux sur Nil) étaient en vacances et j’avais dejà commencé à chercher comment faire des choses. Après lire pas mal de post, ainsi que d’autre sites internet, finnallement je m’y suis inscrite et commencé a poster. Au début, en demandant à l’aide. Après sourtout à la pause café, en chacheant de plein choses différentes, plus ou moins sérieuses. Ok, d’accord, plutôt que des betises, mais c’est une communoté que j’apprecie beaucoup.

Et voilà que petit à petit j’ai posté plus de 1000 fois sur ce forum! Et à chaque fois que j’ai un problème il y en a plein qui sont prêts pour m’aider. Et j’aime bien aussi les discussions plus ou moins phylosophiques de pause-cafè.

Il fait pas longtemps, sur un fil de discussion du forum j’ai connu qu’il y a un logiciel qui s’appelle Boinc. Qu’est-ce que c’est celà? Boinc est un petit programme qui fonctionne quand on n’utilise pas l’ordinateur et qui profite des ressources pour faire des calcules compliqués pour des projets scientifiques. Et voilà que petit à petit je m’y suis interessé. J’ai réussi à faire marcher Boinc sur Nil. J’ai choisi deux projets, évidentment, sur des conformations de proteines, et je vois comme la graphique des calcules qui fait ma machine monte chaque jour.

C’est rigoló.

Le même gars qui m’a coinvancu pour l’histoire de boinc, il m’a aussi recrouté pour l’equipe “alliance francophone”, qui n’est que un ensemble de gens qui ont tous ses ordinateurs en train de calculer comme des malades avec le but d’être l’equipe qui a fait le plus de points de calculs. Sincèrement, moi je m’en fous un peu d’être classé la première ou la dernière. Je suis dejà contente de participer. Et comme de toute façon, l’AF est le troisième mondiale… OUPS! non!! vous avez pas lu ça! Je fais tout le possible pour pousser bien vers le haut la classification de l’AF! J’arrête pas! On va gagner!Ouf…

Dans l’equipe français, il y a des Mini-Teams, et moi je fais partie du mini équipe Linux. J’ai ajouté un deuxième link à côté. Il amene directement sur le site que “mon recrouteur” a mis en place il ne fait pas longemps. Ce site ajoute Boinc, Linux et l’Alliance Francophone. Il est assez nouveau mais il y a dejà pas mal d’infos.

Comme lui, il se plagnait de pas pouvoir tout faire, je lui ai proposé de l’aider en ce que je pourrai bien faire. Et voilà que je suis devenu “moderateur” du forum du site. WOW. Et voilà oui, je suis moderateur, pas moderatrice, parce que je suis, pour le moment, l’unique fille du site et sauf voir mon surnom en rose (BERG!) j’ai pas d’autres privileges. Bon, oui, j’ai un privilege génial: je peux exprimer mon avis sans crainte dans la parti privé reservé aux administrateurs et moderateurs.

Voilà, premier post sur Linux. J’espère qu’un jour je pourrai poster des astuces et autres trucs pour utiliser Linux, et bien sur, la distro Debian. Mais pour le moment, on va se contenter de ça!

Connaisez vous un peu de biotech? Non? Bon, moi j’y passe la journée à faire des trucs catalogués de science-fiction pour des gens non connaisseurs.

Pour ma thèse, j’ai besoin d’une grande quantité d’une metallothioneine, un type de proteine qui est capable de s’unir à des metaux lourds. Pour avoir cette proteine, il y a deux moyens. Le premier est prendre l’organisme en question, le gonfler à metaux lourds (cadmium, mercure…) et, une fois la pauvre bête est morte, purifier la proteine. Bien sur, celà peut poser un tout petit problème étique selon l’organisme à étudier.. imaginons s’il s’agit de l’home!

Donc, il fait longtemps, jadis, un deuxième méthode a été mis en place: clonnation de bacteries qui vont produire cette proteine recombinante en grande quantité. Et touer des milions de bacteries, celà ne pose des soucis à personne.

Et c’est ce deuxième méthode que je fais: je prepare des bacteries qui sont capables d’exprimer en grande quantité un gène d’un animal vachement plus grand (non, ce n’est pas d’une vache!). Comment on fait celà? Oh, c’est facile! D’abord, on prend le gène désirée, on fait une PCR, qui est une technique que permet d’amplifier exponentiellement la quantité de copies du gène. Tout suite, on coupe les extremités dans des endroits qu’on a dejà dessiné avec la PCR. Cette coupure permet que les deux cotés de la sequence soient cohésif, c’est à dire, collants. Celà aide à la ligation de notre gène avec le vecteur d’expression. Un vecteur d’expression est une molécule d’ADN circulaire qu’on va introduir dans la bacterie et qui va nous permetre d’induire l’expression du gène cloné, et donc la production en grande quantité de la porteine codé par ce gène. Il nous reste maintenant que transformer les bacteries avec ce vecteur d’expression qui porte le gène desirée, et preparer de grandes cultures bacterienes d’où on va purifier la proteine.

C’est facile, non? Et, bon, non. Une fois le protocole est absolutement mis en place, on peut avoir la bacterie clonée en 5 jours, plus ou moins. Mais il y a plein trucs qui vont faire retarder le résultat de temps et de temps, et de temps, et de temps..et..

D’abord, il faut optimiser la PCR. Il y a plein facteurs qui affecten le résultat: dès les concentrations des différents produits utilisés au bon dessin des amorces. Les amorces sont des petits morceaux d’ADN qui vont s’unir aux extremités de la sequence à amplifier pour permettre à la polymerase commencer à copier. Dans mon cas, une partie des amorces est extactement le début ou la fin du gène de ma proteine, mais une autre part sert à introduire une cible pour pouvoir couper et avoir les extremes cohésifs.

Après plusieurs essais, une fois la quantité de Mg optimisée, ainsi que le temps de PCR, cycles, quantité de buffer, polymerase, ADN … bref, après une journée d’essai (avec de la chance), on est prêts pour preparer une PCR pour avoir ce qu’on nomme l’INSERT, parce que c’est le gène qui va s’inserer au vecteur.

Là j’aimerai avoir une web cam pour vous regarder: les biologistes on suivi, les autres celà fait un moment qui se sont perdus, voir arreter de lire.. et même, parmi les connaisseurs, il y en a qui vont me corriger?

Bon, voilà la premiere journée de boulot: on laisse tourner la PCR définitive overnight et le lendemain matin on va continuer nos manips. Et je laisse aussi mon poste ici, histoire de pas être trop lourde!

Dimanche, soleil, des amis… BARBEQUE!

Cette fois c’était mon ami Laura, avec son copain Jordi et un autre ami, Jordi aussi (vous pouvez aller vers sont blog avec le lien du blogroll).

Il a fait une si bonne journée qu’on a digerée sur la pelouse. Je vous laisse quelques photos et un petit vidéo. Par ordre: les chefs J&J bien concentrés à griller les saucisses, cotelettes, poivrons et artichots; et un détaill de la table 5 minutes avant qu’il disparaisse le “Masclet“, une boisson inventé à Reus et qui est un mélange 50-50 de vermouth et plim, boisson refrechissante aux aromat de fruits typique de Reus aussi. Pas besoin de dire qu’on ne s’en rend pas compte mais le masclet descent très vite… et mointe aussi très vite!

Mes calif en chimie

Petit post avant dormir. Juste trois secondes pour vous annoncer que j’ai eu 7,5 sur 10 en mon examen chimie.

Qu’est-ce que j’aurai pu avoir si j’aurai eu le temps d’étudier? uooooo

Maintenant il faut que je m’y mette pour la deuxième partie du cours, ce qui n’est pas gagné du tout!

Ma montée au Montcau

Dimanche dernier, finnallement on n’allait pas recevoir mes amis à la maison. On c’est levé assez tôt et on a regardé la carte du parc naturel que j’ai. Le parc naturel de “Sant Llorenç del Munt i l’Obac” il a été déclaré en 87 et fait plus de 13.000 ha. Il y a plusieures montagnes dont la plus haute, La Mola (la molaire) fait vers les 1100 m.

Le paisage est typiquement méditerranéen, avec des forets de chênes, pins et toutes les arbustes bas caracteristiques. D’ici-delà on voit des monolites calcaires, avec des formes assez drôles dues à l’erosion par le vent. Parce qu’il fait du vent! Purée qu’il fait du vent là haut.

Voilà deux photos prises vers la moitié du chemin parcouru:

Nous, on a décidé de faire un parcours en partant du Coll d’Estenalles (col des tenailles, après vous direz que le français et le catalan ne se rassemblent pas!). On a passé autour du Montcau, en profitant de visiter des cavernes où il y a des restes Neolitiques et après manger sur une terrasse à vue magnifique, on a monté au Montcau.

Les photos que vous venez de voir on été prises dès la terrasse naturelle où on a pris notre repas. Bien sur, le picnique que ne pouvez pas manquer: pa amb tomaca avec de la xarcuterie ibérique! mmm! Celà ne vous fait pas envie?

Les cavernes surement sont très interessantes mais on a eu le malheur de croiser un groupe d’une 50aine de scouts, et ce n’est pas la meilleure façon de visiter un endroit comme ça! La plus longue fait plus de 350 m de profondeur et il y a un petit ruisseau à l’interieur. Bon, maintenant avec la secheresse c’est un petit ruisseu, je ne sais pas ce que celà a été à l’époque. C’est rigoló de voir que dejà en ce moment là ils avaient de l’eau courrante à la maison! Ceci est une photo prise dès l’interieur d’une autre caverne, moins longue et où notre espèce a habité aussi. C’est la photo-concept…

Et pour finir cette “dure” journée de magnifique prommenade, je vous laisse un vidéo de la montée au Montcau. Et c’est dans le vidéo que vous savrez l’hauteur de cette montagne. Enjoy!

Mon week-end de stress

Vendredi, 10h du matin. Je suis à l’aeroport en attendant que Julien arrive. Il a mis une démi heure à avoir sa valise, mais finnallement je peux le serrer dans mes bras! C’est dur d’avoir ton compagnon loin, mais maintennat il y a 75 heures devant nous pour être ensemble.

On part de l’aeroport direction.. mon labo. J’ai des trucs à faire, evidentment. Aujourd’hui mes collègues sont bien excités parce qu’ils partent en weekend ensemble, à une maison rurale. Ce n’est pas tout le labo qui y va, mais Miriam, Montse et Freddy, mes trois collocataires de paillasse, oui. C’est comme le jour d’avant les vacances. En fait, on ne travaille qu’a moitié. Vers 14 heures tout le monde se casse. Eux direction Olot, nous, vers Vacarisses.

16h. On est en train de faire les courses à Alcampo. J’ai rien au frigo. Pour le moment, tout va bien. On est ensemble, on met dans le caddy des petites gourmandises en rigolant. On parle du weekend raté avec Jordi et Laura à Capafons. C’était le weekend de la miel et eux vont y passer les deux jours, en dormant à l’hotel. Nous on ne peux pas faire celà. Il faut absolument que je garde de l’argent pour rembourser ce qui me réclame le ministère.. et je veux bien aller au mariage de Mery cet eté!!

On achette des trucs pour l’appero de dimanche. Normalement Alejandra, mon amie du département de génétique, la premiere personne qui m’a parlé dans cette maison de (mot auto-censuré) et que maintenant fait parti de mes Amis à majuscule (Club reservé à moins de 5 privilegiés), bref, Ale, avec son mari et son fils, ainsi que Fer et sa copine doivent venir manger un “asado argentino” à la maison dimanche. J’ai dejà demandé la barbecue à mon frère. Celà va faire un dimanche sympa!

Et la catastrofe commence: 17h30. Je reçois un appel de ma mére: il y a un soucis avec les factures du téléphone. Il faut qu’on parle et qu’on leurs appelle pour arranger tout celà. On est sur le chemin vers la maison, ce n’est pas possible de parler maintenant. Je racroche et je sais que celà va vouloir dire qu’il faut que je rentre à Reus ce wee. Au moins pendant une démie journée pour essaier de voir ce qui ce passe cette fois avec telefonica et ses vols continuums.

À 19h je donne un cours particulier à Sabadell. Si le samedi on doit aller à Reus, et le dimanche j’ai besoin de la barbecue.. quand est-ce que je vais chez mon frère, à Olesa de Montserrat, la chercher? Pas possible. En plus, aller à Reus va m’empecher de ranger un peu la maison.. celà doit faire 2 mois que je ne nettoye pas! Bon, j’exagere.. celà fait dès la calçotada que j’ai pas nettoyé. C’est crade partout. C’est degeulasse.

18h05. J’appelle le garçon à qui je dois donner le cours pour essaier de le changer pour lundi prochain. Pas possible. Il est tout stressé parce qu’il a l’examen de physique lundi matin. Ok. Pas de probléme. D’abord il faut s’occuper des trucs importants. Je dois partir lui donner un cours intensif de physique pour essaier de ratrapper tout ce qu’il comprend pas.

18h30. Mon frère m’appelle pour savoir quand est-ce qu’on passera chercher la barbecue, et si on va rester manger avec eux, ou dinner. Je lui dis que je sais pas encore. En tout cas, pas aujourd’hui.

18h35. Je suis au point d’une crise d’angoisse. J’ai que deux mans! je veux être calme avec julien, passer un weekend sympa, même s’il y a des trucs à faire (comme le cours aux enfants). Mais je ne peux pas gerer trente mile choses au même temps!

18h40. J’appelle Alejandra pour lui dire que cela va être mieux si on laisse tomber la bouffe de dimanche, bien sur s’ils n’ont pas encore achetté la viande. Elle ne sait rien. Normalement elle devrait y aller avec son mari demain, mais elle va me confirmer en arrivant chez soi. En plus, Fer et sa copine se sont decommandés au dernier moment. Du coup on se dit qu’on reportera celà pour un autre weekend où tout le monde sera plus calme. Bien évidentment si sont mari n’a pas achetté la viande!

19h05. Je commence le cours à Sabadell. Deux heures de cinematique et dinamique. Niveau année avant de terminale.

22h30. Je suis de retour chez moi. Julien a préparé la table pour dînner. Il y a des trucs à rechauffer au frigo et on peut manger ensemble.

23hquelques. On regarde un épisode de Scrubs. On rigole bien. On regarde un deuxième et je m’endort sur le canapé. Dans un nuage, je me leve, je me brosse les dents et je me met au lit. Bonne nuit…

Samedi matin, vers 10h-10h30. On prend un petit dej mais je suis vraiment stressé. J’appelle ma mère. Je sais que je ne serai pas calme jusqu’à toute cette histoire soit reglé. Alors on décide d’aller à Tarragona, manger quelque part, prendre une glace sur la plage en profitant du super beau temps qu’il fait… et après aller chez maman pour voir ces factures.

14h. On est en train de manger dans un resto dit japonnais mais dont le propietaire est chinnois. Ceci a été le premier restaurant japonnais de Tarragona, et appart les sushis, toute l’autre bouffe est chinnoise, mais chinnoise maison. C’est pas le truc typique de tous les restos chinnois. Mais dès la derniere fois que je suis venue, il a multiplié le prix. Celà est très très cher! purée…

15h. On est sur la plage. Il y a du monde! Quelle belle journée, dommage ce peu de vent maritime qui fait que j’ai un peu froid. On prend le soleil. On se prommene sur les rochers. Il y a deux fous qui essaient de surfer.. mais y a pas des vagues ici!

17h. Chez maman. J’appelle Telefonica. Après milheures d’attente ils vont réparer l’erreur et on va se faire rembourser dans la prochaine facture. On va faire quelques courses avec maman. On dine avec elle et on part.

21h. Sur le chemin de retour mon portable sonne. C’est Jordi, le copain qui nous avait proposé de passer le weekend de la miel. On profite un arret stratégique sur la route (achat de chewing-gum) pour l’appeler. J’appele au portable de Laura, sa copine. Ils ne répondent pas.

21h.45 Toujours sur le chemin, Jordi appelle à nouveau. Jul répond et lui dit à Jordi qu’on n’est plus à Reus. MAIS! on n’était pas sensés d’y être! On restait à Vacarisses pour le weekend et ils allaient au week de la miel!

presque 23h. On est à la maison. J’appelle Laura. Elle ne sait rien des appels. Finnallement je comprend ce qui c’est passé: ils ne sont pas restés dormir là bas. En plus ils étaient dans deux voitures différentes, donc ce n’était pas possible qu’elle sache. Jordi nous appellait pour prendre un verre à Reus. Là je ne comprend pas, parce que par mail on avait dejà dit qu’on vennait pas. Et si on était à Reus l’aprem celà n’était pas prévu du tout.

Une heure plus tard (au moins) on finit de chacher. On n’a pas de fin Laura et moi pour parler! C’est très tard.. on va dormir et on verra si demain il fait beau et on peut partir marcher un peu dans le parc naturel. Finnallement il n’y aura pas de barbecue. On va essaier de ratraper le weekend demain, et peut être je me calmerai un peu après avoir fait presque 200km aller-retour dans la meme journee!

Et voilà que oui, on a ratrapée le week-end. La prommenade a été magnifique mais je la raconterai dans un prochain post,avec des photos!

6h30. Bip-bip-bip-bip ouf, reveil. je l’arrette.

6h34. Bip-bip-bip-bip. ouf, oui. je l’arrette.

6h38. Bip-bip-bip-bip. oui, ouf, oui je dois me lever.

6h42. Bip- D’ACCORD! JE ME LEVE!

Pantouffles… brrr.. froid… lumière.. OUF! sommeil…

j’allume la radio. “7 heures moins le quart du matin, bonjour! Voilà ce qui ce passe sur nos rutes aujourd’hui!” eh, meee, plein bouchons. Comme d’hab, et plus: il pleut un ptit peu, il y grève de bus? non, il y a match du barça se soir.

douche.. j’ai raté quelque chose…

serviette.. mais si, ils ont dit quelque chose d’important…

peigne… je suis sure qu’il y a quelque chose..

“Bon dia, són les 7 en punt del matí!”

le thé est prêt, pain, beurre.. mais, mais… MAIS! Oh! non! Match du barça, celà veut dire pas de parking au coté du labo! Oh, non! Et celà veut dire soit, prendre le train à Vacarisses (un chaque heure), soit aller jusqu’a l’université autonome, pour prendre là les ferrocarrils de la généralité pour arriver au labo…

Oh, non! Quelle heure il est? Pas le temps d’avoir le train. Je pars à l’université autonome.

Préparation des tuperware avec la bouffe de midi. Sac à main. Argent? oui. C’est bon. Voiture. On y go.

Voitures.. voitures.. C’est étonnant qu’il suffit qu’il tombent deux gouttes et du coup il y a dix fois plus de bagnoles sur le chemin.

Je me gare près de l’arret. Une T-10 voyages. 2 zones. 14,50 euros. Purée, c’est plus cher chaque mois.

5 minutes et je prends le train. Il fait chaud, il y a trop de monde, j’aime pô. J’arrive à Barcelona et je prends le bus jusqu’à l’université centrale, campus diagonal.

9h45. j’arrive au labo. Chaque fois que je prend les transports en commun je me fais abduire pendant des heures. Je suis sure qu’il y a des aliens qui me kidnapent. ce n’est par normale, non? je me suis levé à 6h30 quand même! Bon, presque.

Journée chargé: purification de bande des PCR faites hier, double digestion, miniprep du vecteur, double digestion et defosforilation. Je mange en 30 minutes. PCR d’un domaine de ma proteine. Piquer des colonies transformés hier. Purification du vector digeré.

Dernier gel pour quantifier avant la ligation et je pourrai partir.. Il est presque 18h! c’est plus tôt que jamais, hé hé! peut être j’arriverai pour le cours de chimie.. dès fevrier que j’y suis plus allée!

Il y a rien sur le gel. J’ai perdu l’ADN. J’ai perdu mon vecteur. Tout le boulot est parti en c…

NOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOO

Voyons le bon coté: je pars une démie heure avant que prévu. J’ai pas besoin de faire la ligation s’il y a rien, non?

J’y vais. Si je me depeche, j’arriverai au cours.

Merde, non. j’ai pas ma voiture ici. Il faut prendre le bus, le train, arriver à l’université autonome, choper la voiture et arriver à terrassa… ouf. J’essaie.

Je sors du labo. je vois passer mon bus. j’attend le suivant

j’attend.

j’attend.

Le 74 arrive et je peux finnallement partir. Le train est plein à craquer. Je me rend compte que j’haïs les transports en commun. Bon, pas les transports en commun, j’haïs les gens qui vont dans les transports en commun et qui me touchent, me poussent, me pressent… j’aime pô!

Université autonomme: je prends ma voiture et j’arrive à terrassa. Trop tard. Et m… encore!

Ce qui a sauvé un peu la journée c’est d’avoir rencontrée Araceli, on a chaché un bon moment, on a pris un nestea. Et je suis rentrée quand j’ai vu l’heure!

22h j’arrive chez moi. je prepare vite fait une sauce pour les pâtes cuisinés hier. Je dinne en parlant avec Julien par skype.

J’ai pas trop sommeil. Je viens de manger et ce n’est pas trés bon de se coucher tout de suite. Je regarde mes mails en prennant le dessert. Je décide d’écrire ce post..

Mais! ce n’est pas possible! il est dejà minuit?!?!?! Mais comment je fais pour perdre autant de temps à rien foutre?

Bonne nuit!

Ma santé…physique

Oui, physique parce que pour parler de ma santé mentale il faudrait écrire un gros bouquin!

Où est-ce que je n’était de mes plaintes? Ah, oui. D’un côté, mon rhûme eternel. Qui, si bien c’est arreté au 98%, il continue à faire chier de temps en temps. J’ai des journées où je ne tousse pas, il y a des journées où j’arrête pas d’éternuer. Je ne suis plus retournée chez le médecin parce que je n’ai pas envie qu’il se mette a fouiller les trente mile maladies rares qui éxistent au monde. J’ai décidé unilateralement que les amis de #dixsous ont plein raison et ceci est une allérgie à quelque chose, va savoir quoi.

Et sinon, bonne nouvelle: après la dernière visite chez le dentiste, tout est correcte. Plus de bobo aux dents, plus de bobo à la machoire ni au visage. Celà a mis presque trois semaines, mais maintenant je mange à nouveau des cacauettes et je peux finnallement CONDUIRE EN MACHANT DU CHEWIN-GUM! uououo! je suis accro aux Trident verts en conduisant.

Et celà va être pendant un bon moment parce que je ne pense pas me faire enlever ceux qui manquent tout de suite. Il faut d’abord que le côté droit soit complétement soigné (oui, il reste un petit trou qu’il faut fermer), que je soit mentalisé d’avoir à nouveau ce douleur.. et que mes finances surmontent cette falaise qui a fait le dentiste sur mon compte bancaire.

Juste petit dernier détail santé. Je suis allée voir maman ce week-end et, bien sur, elle était toute dégouté parce que j’ai à nouveau maigri, et selon elle, ce n’est pas possible que le stress de la thèse m’emporte la santé de cette façon… eu, je crois que oui, un peu c’est la thèse, mais manger pas beaucoup pendant trois semaines, je crois que celà aide un peu non? Et c’est qui est bien est que maintenant je peux me remplir de tout ce que j’aie envie à manger, sans autre soucis. Promis, je ferai un peu de gim aussi.. quand j’aurai le temps.

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